Набор SmartX для получения аутологичной стромально-васкулярной фракции жировой ткани.
Первый зарегистрированный в России набор РУ от 1 июня 2020 года № РЗН 2020/10484
Подготовка
- Стерилизация (Автоклав под высоким давлением): 4 гнезда (ячейки) в центрифуге, набор лотков инкубатора
- Параметры оборудования: Центрифуга = 1500g (RCF), 2 минуты
Встряхивающий инкубатор = 200 об/мин, 30 минут, 37.5°C
В день экстракции СВФ до начала липосакции установите необходимые параметры оборудования и повысьте температуру встряхивающего инкубатора до необходимой
- Тележка с перевязочным материалом и стерильная драпировка
- Шприц BD (Becton Dickinson, с винтовым соединением) 60мл - 3 шт [= 1 шт для промывки с физ.раствором + 2 шт для взбалтывания]
- Шприц 25мл - 3 шт [= 2 шт для смешивания с энзимом + 1 шт для забора экстракта]
- Шприц BD (Becton Dickinson, с винтовым соединением) 10мл - 2 шт [= для финального экстракта]
- Набор SmartX и охлажденная до 4°C коллагеназа [ = 2 ампулы по 3125 ЕД ]
- Алкогольный опрыскиватель, алкогольный скраб [= для смешивания с энзимом ]
- 500 мл обычного физиологического раствора (0.9% хлорида натрия) [= для смешивания с энзимом, промывки и т.п.]
- Чашка [ = для отходов ]
- Инъекционные иглы 18G - 2 шт, перчатки - 2 пары (размера 6½), марля 4 x 4
- Хирургический костюм, шапочка и маска
1 Сепарирование
-
Подготовьте ампулу с коллагеназой не менее 3125 EД, добавьте в нее 25 мл физраствора и смешайте их друг с другом.
Всего приготовьте 2 ампулы с раствором
-
※ Соотношение
(коллагеназа с физраствором) : жир = 1 : 1※※ Соотношение
(коллагеназа 125 ЕД) : (жир 1 см3) = 1 : 1Смешайте 25мл физраствора с 25мл чистого жира в 60мл шприце с винтовым соединением, оставив при этом около 10мл воздуха для полноценного смешивания в встряхивающем инкубаторе.
-
Готовые шприцы с раствором необходимо поместить в инкубатор для равномерного смешивания жира с коллагеназой (необходимо закрыть шприц верхней пробкой).
-
Необходимо перенести уже смешанный раствор в шприц SmartХ. Шприцы SmartX с содержимым необходимо отцентрифигировать для сепарации слоев (см. параметры центрифугирования).
2 Экстракция
-
Экстракция СВФ
※ Будьте осторожны!
Не перемешивайте слой СВФ!После центрифугирования имеем 3 слоя, необходимо удалить верхние 2 слоя и оставить самый нижний слой, который и содержит SVF. Соберите экстрагированный слой SVF и переместите его в отдельный шприц ( промойте оставшийся слой SVF на поршне с помощью физраствора и также переместите в шприц). Необходимо перенести все собранные клетки.
-
Собрать экстрагированный слой СВФ и переместить его в шприц
✔ Промойте оставшийся слой СВФ на поршне с помощью физразтвора и также переместите его в шприц
Необходимо собрать со всех шприцов SmartX полученный SVF в один шприц (малый с винтовым соединением). Для полного забора остаточного SVF с поршня шприца, нужно добавить немного физраствора, аккуратно встряхнуть и также переместить его в общий шприц.
3 Промывка
-
⇒ 1-я промывка
Процесс промывки направлен на удаление остаточной коллагеназы из раствора. После того, как собрали всю СВФ в одном шприце, необходимо перенести его содержимое в последний шприц SmartX, заполнить оставщуюся часть физраствором и отцентрифугировать его (см. параметры центрифугирования).
※ При промывке отведите поршень чуть назад, чтобы освободить гранулы СВФ.
※ При использовании центрифуги вставьте с противоположной стороны шприц SmartX, заполненный водой, для того, чтобы центрифуга была сбалансирована.
-
После центрифугирования (сепарации слоев), удалите все слои выше слоя СВФ. Затем смешайте оставшиеся гранулы СВФ с физраствором еще раз. Повторите процесс промывки и центрифугирования дважды.
⇒ 2-я, 3-я промывка (всего требуется три промывки)
※ Промывка требуется для уверенности в том, что не осталось остаточных энзимов (коллагеназы) среди гранул СВФ.
4 Фильтрация
-
После центрифугирования перенесите 1 мл гранул СВФ (из нижней части шпприца SmartX) в 10мл BD шприц, затем пропустите их через фильтр (размер фильтра 100 мкм или меньше) и получите экстракт.
-
Отфильтруйте ещё раз с физраствором для получения желаемого объема.
※ Для IV этапа, если есть PRP или лейко-тромбоцитарный слой, то можно его добавить и провести фильтрацию еще раз (чтобы отрегулировать объём финального экстракта).